home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ The Arsenal Files 6 / The Arsenal Files 6 (Arsenal Computer).ISO / health / med9604b.zip / M9640648.TXT < prev    next >
Text File  |  1996-03-04  |  2KB  |  39 lines
  1.        Document 0648
  2.  DOCN  M9640648
  3.  TI    Mutations of basic amino acids of NCp7 of human immunodeficiency virus
  4.        type 1 affect RNA binding in vitro.
  5.  DT    9604
  6.  AU    Schmalzbauer E; Strack B; Dannull J; Guehmann S; Moelling K; Institut
  7.        fur Medizinische Virologie, Universitat Zurich,; Switzerland.
  8.  SO    J Virol. 1996 Feb;70(2):771-7. Unique Identifier : AIDSLINE MED/96135185
  9.  AB    The nucleocapsid (NC) protein of human immunodeficiency virus type 1 is
  10.        required for packaging of viral RNA and for virion assembly. It contains
  11.        two clusters of basic amino acids, consisting of five and four amino
  12.        acid residues, flanking the first of its two zinc fingers. These amino
  13.        acid residues have been mutagenized to neutral ones individually, as
  14.        well as in various combinations, by site-directed mutagenesis. Wild-type
  15.        NCp7 and the mutant proteins were expressed as recombinant proteins in
  16.        Escherichia coli, with six histidines as tags at their amino termini in
  17.        order to allow efficient purification. The purified proteins were
  18.        analyzed for RNA binding in vitro with human immunodeficiency virus type
  19.        1 5' leader RNA transcribed in vitro. Assays comprised Northwestern
  20.        blots at various salt concentrations and filter binding tests which
  21.        allowed determination of the dissociation constants of the various
  22.        mutants. The results indicated that mutations of the amino acid R-7 and
  23.        of R-32 and K-33 were more critical for RNA binding than other
  24.        mutations. Mutation of the other amino acid residues reduced the binding
  25.        affinity in proportion to the number of mutations. Mutation of seven of
  26.        the nine basic amino acid residues reduced the binding of RNA by 50- to
  27.        90-fold.
  28.  DE    Amino Acid Sequence  Base Sequence  Blotting, Northern  Blotting,
  29.        Western  Capsid/GENETICS/ISOLATION & PURIF/*METABOLISM  Cloning,
  30.        Molecular  DNA, Viral  Gene Products, gag/GENETICS/ISOLATION &
  31.        PURIF/*METABOLISM  Human  HIV-1/*METABOLISM  Molecular Sequence Data
  32.        Mutation  Recombinant Fusion Proteins/GENETICS/ISOLATION &
  33.        PURIF/METABOLISM  RNA, Viral/*METABOLISM  Structure-Activity
  34.        Relationship  Support, Non-U.S. Gov't  JOURNAL ARTICLE
  35.  
  36.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  37.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  38.  
  39.